RESUMO: Plantas de macieira originárias da França introduzidas no Brasil para fins de pesquisa foram submetidas à análise no Laboratório de Quarentena Vegetal da Embrapa Recursos Genéticos e Biotecnologia (Cenargen). Após realizar a enxertia em porta-enxertos sadios, algumas plantas apresentaram sintomas típicos de infecção por fitoplasmas. Os testes por meio da técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) obtiveram fragmentos de DNA do tamanho esperado para fitoplasmas. O sequenciamento de DNA revelou uma identidade de 98-99% da região 16 rDNA dos fitoplasmas encontrados com o fitoplasma ‘Candidatus Phytoplasma solani’. Essa espécie de fitoplasma é responsável por perdas em pomares de maçã europeus e não foi relatada no Brasil. De acordo com a Legislação Federal de Proteção de Plantas, as plantas de macieira foram incineradas para evitar a entrada dessa praga exótica no Brasil.

ABSTRACT: Apple plants from France introduced in Brazil for research purposes were subjected to a phytosanitary analysis at the Plant Quarantine Laboratory of Embrapa Genetic Resources and Biotechnology (Cenargen). After grafting onto healthy apple rootstock, some plants showed phytoplasma-infection symptoms. Polymerase Chain Reaction (PCR) tests yielded DNA fragments of the expected size for phytoplasmas. DNA sequencing revealed an identity of the 16S rDNA nucleotide sequence of 98-99% with ‘Candidatus Phytoplasma solani’. This phytoplasma species is responsible for losses in European apple orchards and has not been reported in Brazil. According to the Federal Legislation on Plant Protection, the plants were incinerated to avoid the introduction of this exotic pest in Brazil.

Resumo: A demanda por segurança alimentar e nutricional delimita modelos de intensificação da agricultura em que a prevenção de perdas na produção é essencial. O cenário de agricultura globalizada, o aumento das rotas de comércio e o deslocamento de pessoas e produtos maximiza o potencial de introduções inadvertidas de pragas em áreas indenes, colocando em risco os sistemas produtivos. A quarentena vegetal é apresentada como medida disciplinadora à movimentação de vegetais, para limitar a dispersão de pragas agrícolas. A vigilância preconiza a antecipação e reconhece a ameaça, privilegiando a acurácia e a eficiência do diagnóstico, a consolidação de metodologias de análise de risco de pragas e a evolução das ferramentas operacionais. Com apropriação de novas tecnologias, melhoria das estruturas fiscalizadoras e forte capacidade inovativa, esperam-se respostas aos desafios impostos à segurança da agricultura. Este trabalho aborda aspectos históricos relacionados às ações quarentenárias, ao arcabouço legal, à influência do comércio internacional, às ferramentas analíticas, às perspectivas de inovação e à qualificação da infraestrutura. O objetivo deste trabalho é contextualizar a importância do risco de introdução de novas pragas ante uma agricultura pujante e a intensificação do intercâmbio comercial. Analisa, igualmente, desafios para ações de quarentena vegetal, ao mesmo tempo em que alinha bases biológicas sobre as quais a regulação fitossanitária deve se sustentar, como subsídio para a formulação de dispositivos legais.

Abstract: The demand toward food and nutritional security delimitates models for agricultural intensification, in which yield loss prevention is essential. The globalized agriculture scenario, the increase of trade routes, and the displacement of people and products maximize the potential of nondeliberate pest introductions in undamaged areas, endangering the production systems. Plant quarantine is presented as a measure to control plant product movement, in order to limit the dispersal of agricultural pests. Surveillance advocates the anticipation and recognizes the threat, focusing on the accuracy and efficiency of the diagnosis, on the consolidation of methods of pest risk analysis, and on the evolution of operational tools. Responses to the challenges posed to agriculture security are expected, considering the appropriation of new technologies, enhancement of inspectorate structures, and a strong, innovative capacity. This work approaches the historical aspects related to quarantine actions, legal framework, influence of international trade, analytical tools, innovation perspectives, and infrastructure qualification. The objective of this work is to contextualize the risk importance of introducing new pests, faced with a thriving agriculture and the intensification of commercial interchange. It also analyses the challenges to plant quarantine actions, while it aligns the biological grounding on which the phytosanitary regulation should be sustained, in order to subside the formulation of legal security measures.

Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar as informações qualitativas e quantitativas sobre as interceptações de pragas ausentes não regulamentadas e quarentenárias em material vegetal importado. As informações sobre interceptações de pragas pelo serviço de quarentena vegetal da Embrapa, no período de 1977 a 2013, foram obtidas em um banco de dados, atas laboratoriais e listas de interceptação publicadas. As interceptações foram analisadas de acordo com regulamentação das pragas, espécie vegetal, parte vegetal importada e origem. O material foi categorizado em sementes botânicas e material de propagação vegetativa. No período do levantamento, foram interceptadas 75 espécies de pragas em 114 eventos de interceptação. Fungos, vírus e ácaros constituem a maior parte das interceptações, e a maioria delas ocorreu em lírio, oliveira, trigo, uva, arroz, batata e maçã. A taxa média anual de infestação/infecção do material vegetal analisado é de 2% dos processos de importação. O material para propagação vegetativa apresentou maior taxa de infestação/infecção por pragas do que as sementes botânicas. Das espécies-pragas interceptadas, 63% não são regulamentadas como quarentenárias para o Brasil. Esses resultados indicam a necessidade premente de revisão da atual lista de pragas quarentenárias do País.

Abstract: The objective of this work was to evaluate qualitative and quantitative information on interceptions of quarantine and absent non-regulated pests in imported plant material. Information concerning pest interceptions by Embrapa's plant quarantine service during the period of 1977-2013 was obtained from a database, laboratory reports, and published lists of intercepted pests. Data interceptions were evaluated according to pest regulations, plant species, imported plant parts, and origin of importation. The plant material was categorized as botanical seeds and plant material for vegetative propagation. In the survey period, 75 pest species were intercepted in 114 interception events. Fungi, viruses, and mites were the most intercepted ones, and most interceptions occurred in lily, olive, wheat, grapes, rice, potato, and apple. The average annual rate of infestation/infection of the evaluated plant material was 2% of the import processes. The material for vegetative propagation had a higher rate of infestation/infection with pests than botanical seeds. Of the intercepted pests species, 63% are not regulated as quarantine pests for Brazil. These results indicate the urgent need to review the current list of quarantine pests in the country.

Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar o aspecto fitossanitário de dois acessos de sementes de milho dos Estados Unidos introduzidas no Brasil, quanto à presença do Wheat mosaic virus (WMoV). Duas a três semanas após a semeadura, folhas sintomáticas foram testadas por Elisa, tendo-se utilizado antissoro específico para WMoV. A reação foi positiva, e as amostras foliares foram analisadas por PCR em tempo real e os produtos de PCR amplificados foram sequenciados. Os isolados de WMoV apresentaram 99 a 100% de identidade nucleotídica com isolados da Austrália e dos Estados Unidos. Até o momento, não há relato da presença desse vírus no Brasil. De acordo com a legislação federal de defesa vegetal, as plantas foram incineradas para evitar a introdução dessa praga exótica no País. Os resultados obtidos mostram a interceptação de WMoV no Brasil.

Abstract: The objective of this work was to evaluate the phytosanitary aspect of two accessions of maize (Zea mays) seeds from the United States introduced to Brazil, regarding the presence of Wheat mosaic virus (WMoV). Two to three weeks after sowing, symptomatic leaves were tested by Elisa using specific antiserum to WMoV. The reaction was positive, and leaf samples were analyzed by real-time PCR and amplified PCR products were sequenced. The WMoV isolates had 99 to 100% nucleotide identity with isolates from Australia and the United States. Until now, there is no report of the presence of this virus in Brazil. According to the federal law on plant protection, the plants were burned to avoid the introduction of this exotic pest in the country. The obtained results show WMoV interception in Brazil.

Os begomovírus (fam. Geminiviridae) possuem um genoma de ssDNA, são transmitidos por mosca-branca, e causam danos importantes em campos de produção de tomate no Brasil. Atualmente, a identificação de espécies de begomovírus é realizada pela análise da seqüência completa do genoma. Devido ao alto custo e dificuldade em se aplicar essa técnica para análises em larga escala, o objetivo desse trabalho foi desenvolver um método de detecção espécie-específico baseado em PCR. Três espécies foram avaliadas para amplificação: Tomato severe rugose virus (ToSRV), Tomato rugose mosaic virus (ToRMV) e Tomato yellow vein streak virus (ToYVSV). Foram testadas treze combinações de primers, e quatro foram selecionadas e avaliadas em um grupo de 82 amostras, incluindo DNA clonado e DNA viral total extraído de plantas infectadas com begomovírus previamente identificados por seqüenciamento direto de produto de PCR. Três combinações de primers capazes de distinguir as três espécies foram selecionadas, e confirmadas por seqüenciamento dos produtos amplificados. Estas combinações foram validadas com amostras de tomate infectadas por begomovírus em campo, demonstrando que a PCR pode ser uma ferramenta útil para separar as espécies virais e detectar infecções mistas causadas pelas três espécies de begomovírus.

The begomoviruses (fam. Geminiviridae) have an ssDNA genome, are transmitted by whiteflies, and cause significant losses in tomato fields in Brazil. Nowadays, begomovirus species identification is carried out through the analysis of their complete genome sequence. Due to the high costs and difficulty in applying this technique to large-scale analysis, we aimed to develop a species-specific detection method based on PCR. Three species were targeted for amplification: Tomato severe rugose virus (ToSRV), Tomato rugose mosaic virus (ToRMV) and Tomato yellow vein streak virus (ToYVSV). Thirteen primer combinations were designed, and four were finally selected and tested against a group of 82 samples, including cloned DNA and viral DNA from infected plants previously identified by direct sequencing of PCR products. Three primer combinations were selected that could distinguish the three species, and confirmed by sequencing of amplified products. These combinations were validated by evaluation of field-collected tomato samples infected by begomovirus and this demonstrated that PCR can be a useful tool to distinguish the viruses and detect mixed infections caused by three begomovirus species.